Zasada działania testów immunofluorescencji (IIFT), ELISA, Immunoblot:
- Zasady działania testów (immunofluorescencja pośrednia, różne substraty w metodzie IIFT, ELISA typu ”capture”, kompetycyjna, lineblot i westernblot)
- opis i funkcja poszczególnych odczynników
- stabilność i przechowywanie próbek oraz odczynników – generalne zasady
Wynik badania przeciwciał:
- sposoby prezentacji wyniku zależnie od zastosowanej metody
- niezbędne elementy wyniku
- interpretacja i analiza wyniku
- wytyczne dotyczące stosowanej metody zależnie od rodzaju przeciwciał
Innowacje metody IIFT wprowadzone przez EUROIMMUN
- technologia BIOCHIP
- technologia EUROPLUS
- technika TITERPLANE (zalety w porównaniu do konwencjonalnej metody inkubacji).
- odczynnik EUROSorb
O czym pamiętać przed wykonaniem badania?
- trwałość odczynników, temperatura przechowywania odczynników i próbek oraz inkubacji
- przygotowanie stanowiska pracy do wykonania badania: materiały zużywalne, opis potrzebnego sprzętu
- przygotowanie próbek pacjentów
- szczególne przypadki postępowania z zestawami testowymi (FTA-ABS, EBV Sekwencja).
Sposób przeprowadzenia inkubacji testu metodą IIFT
- instruktaż wykonania z kluczowymi punktami inkubacji
- automatyzacja metody IIFT
Trudności i rozwiązania w diagnostyce przeciwciał metodą IIFT
- efekt prozonowy,
- intensywna fluorescencja tła,
- brak lub zbyt intensywna fluorescencja,
- reakcje niespecyficzne,
- uszkodzony substrat,
- wyschnięty substrat,
- kompetycyjne wiązanie przeciwciał IgG w badaniu klasy IgM.
O czym pamiętać przed wykonaniem badania?
- trwałość odczynników, temperatura przechowywania odczynników i próbek oraz inkubacji
- przygotowanie stanowiska pracy do wykonania badania: materiały zużywalne, opis potrzebnego sprzętu
- przygotowanie próbek pacjentów
Sposób przeprowadzenia inkubacji testu metodą ELISA.
- instruktaż wykonania z kluczowymi punktami inkubacji
- odczyt wyników na podstawie krzywej wzorcowej
- automatyzacja metody ELISA
- certyfikat kontroli jakości – jakie informacje zawiera?
Trudności i rozwiązania w diagnostyce przeciwciał metodą ELISA
- kompetycyjne wiązanie przeciwciał IgG w badaniu klasy IgM, (IgG/RF Absorbent)
- kalibratory i kontrole- kontrola poprawności warunków inkubacji,
- pararell shift,
- niska powtarzalność wyników.
Innowacyjne antygeny w metodzie ELISA wprowadzone przez EUROIMMUN
- rosnąca liczba antygenów rekombinowanych i ich zalety.
O czym pamiętać przed wykonaniem badania?
- trwałość odczynników, temperatura przechowywania odczynników i próbek oraz inkubacji
- przygotowanie stanowiska pracy do wykonania badania: materiały zużywalne, opis potrzebnego sprzętu
- przygotowanie próbek pacjentów
Sposób przeprowadzenia inkubacji testu metodą Immunoblot
- instruktaż wykonania z kluczowymi punktami inkubacji
- sposoby odczytu wyniku- ocena wzrokowa vs elektroniczna
- automatyzacja metody Immunoblot.
Trudności i rozwiązania w diagnostyce autoprzeciwciał metodą Immunoblot:
- kontrola inkubacji i kontrole koniugatów- kontrola poprawności warunków inkubacji
- ciemne tło
- źle wybarwiony pasek
- reakcje niespecyficzne
- źle skalibrowany skaner
- biały prążek na pasku testowym
- intensywności wybarwienia pasm inne niż oczekiwane
- problem z odczytem test typu westernblot- nakładające się pasma
Innowacyjne możliwości z zastosowaniem testów Immunoblot EUROIMMUN:
- w diagnostyce boreliozy,
- w diagnostyce płynu mózgowo-rdzeniowego,
- w diagnostyce i monitorowaniu kiły.